При качественном определении способности микроор-
танизмов синтезировать витамин В| можно ограничить-
ся выяснением их способности давать зоны роста тест-
организма. В этом случае вместо расстановки цилиндри-
ков на агар можно делать пробочным сверлом колодцы
в агаре и в них закапывать испытуемый гидролизат. По
величине зон в сравнении с величиной зоны, полученной
от стандартного раствора В ;, можно приблизительно су-
дить о биосинтетической активности данного микроор-
танизма (рис. 22).
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ МЕТОД.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЕТЕРОДУКСИНА
В КУЛЬТУРАХ МИКРООРГАНИЗМОВ
Изучаемые микроорганизмы выращивают в жидкой
питательной 
среде, 
разлитой 
в 
колбочки 
емкостью
250 мл, по 50 мл в каждую. Для эпифитных микроорга-
низмов 
можно 
использовать 
капустную 
среду No 
19.
Выращивание ведут в течение 
10 суток. _ Полученную
культуральную жидкость подкисляют 2 н. НС! до рН 1,0
по индикатору тимолблау. Индикатор не приливают к
испытуемой жидкости, а определяют рН в отобранных
пробах.
Для приготовления 2 н. НС! берут 78 г концентриро-
ванной НС! (уд. вес 1,09) и доводят водой объем до 1 л.
Для приготовления индикатора тимолблау навеску ве-
лщества 0,04 г растворяют в 100 мл спирта. Раствор име-
ет красный цвет, который в кислой среде изменяется до
желтого.
Подкисленную — культуральную 
жидкость 
объемом
120 мл разливают тонким слоем в чашки Петри и выпа-
ривают в сушильном шкафу при 40° до 20 мл. Для по-
лучения вытяжек гетероауксина к раствору после его
выпаривания (20 мл) приливают 30 мл серного эфира
и встряхивают в течение 4 часов на качалке в темноте.
После этого жидкость отстаивают 12 часов на холоду;
отстой эфира сливают, а в жидкость снова добавляют
30 мл эфира и повторяют тем же способом получение
вытяжки 
и отстоя, т. е. 
снова 
встряхивают 
4 
часа,
отстанвают 
в 
холодильнике 
12 
часов 
и 
сливают
отстой.
208