) 
вают в пробирки на свежеприготовленную питательную
`среду того же состава.
//° 
В качестве основной среды при анализе используют
ду 
No 4, 
состоящую 
из 
NoН,С! — 2 г, NoС!—3,
эНРО, — 0,4, лимоннокислого натрия — 3, лактозы — ,
‘люкозы — 10, агара — 20 г на 1 л; рН среды 7,0. Стери-
— 
лизация при 0,5 атм в течение 15 минут. Среду No 4 раз-
) ливают в колбы по 100—200 мл.
Перед исследованием образец подготавливают. Для
этого изучаемые микроорганизмы выращивают в чашках.
` Петри на поверхности агаровой среды, затем клетки_со-
” бирают шпателем и высушивают при температуре 45° в
/ сушильном шкафу. На аналитических весах делают на-
вески сухих клеток (около 25 ме каждая) и переносят
в 1%-ный раствор лимоннокислого натрия, разлитый в
` пробирки по 5 мл. Перед стерилизацией в каждую пра-
бирку добавляют по 0,5 мл 5%-ного раствора нитрита
' натрия. Стерилизуют при 0,5 атм в течение 15 минут.
результате такой обработки клеток витамин В,2
В:
|
) раствор. Определение количества витамина В в МИК-
робных клетках состоит в следующем. Основную среё)'
No 4 расплавляют на водяной бане и охлаждают до 50°,
” после чего на 100 мл среды вносят 1,5—2,0 млрд. клеток
. со|! 113-3, смытых с атаровых косяков. Концентрацию
звеси устанавливают по бактериальному стандарту.
Среду с внесенной тест-культурой разливают в чаш-
— ки Петри с ровным дном, примерно по 15 мл в каждую.
` После застывания агара на его поверхности расставля-
|ют цилиндрики (по 4—6 шт. на каждую чашку), в ко-
торые капают 
разные концентрации испытуемых ВЫытЯ-
‚ жек по 0,1 мл 
без разведения и разведенные 1 :2 и 
1 : 4.
Для сравнения в 2 цилиндрика на этой же чашке
капывают по 0,1 мл стандартного раствора витамина
" 1з В концентрации 0,05 мкг на | мл. Стандартный рас-
ор получают разведением 
содержащегося 
в ампуле
|(аптечная упаковка) исходного раствора 1%-ным рас-
ором лимоннокислого натрия до концентрации 
| мке
а 
| 
мл. 
Этот раствор 
разводят 
до 
концентрации
05 мке на 
1 мл. Жидкость из цилиндриков диффунди-
›ует в агар, и при наличии в ней витамина Вуз в зоне
‚диффузии появляется рост тест-культуры. Диаметр зон
оста 
Е. со!! 
вокруг 
цилиндриков 
пропорционален
205