`‘ческому воздействию микроорганизмов при этом объяснялась
наличием прочной связи белка с лигнином, дубильными веще-
ствами, почвенными минералами и т. п.
В более поздних представлениях, развитых И. В. Тюриным
[8—9], С. С. Драгуновым [3], Т. М. Кононовой [4] и др., органи-
ческий азот почвы представлен не белками как таковыми, а спе-
цифическими — веществами 
— продуктами 
конденсации — амино-
кислот, образующимися при автолизе белка плазмы отмерших
микроорганизмов с углеводами, уроновыми кислотами, гумино-
выми кислотами. 
_
В последние годы в нашей лаборатории был разработан ко-
личественный метод хроматографического 
определения 
амино-
кислот из почвенных гидролизатов. Этот метод вкратце сводится
к следующему: навеска почвы в 20—30 г подвергается 24-часо-
вому гидролизу с шестинормальной серной кислотой при слабом
кипячении. Полученный гидролизат освобождается от избытка
серной кислоты путем осаждения ее в виде Ва5ЗО, при добавле-
нии ВаОН. Затем гидролизат пропускается через колонку, напол-
ненную Н-катионом 
(ионообменные синтетические смолы типа
эспатита, вофатита 
и Т. п.). В кислой среде аминокислоты пол-
ностью адсорбируются на катионите, а содержащиеся в гидро-
лизатах прочие органические вещества и неорганические кислот-
ные остатки (анионы) уходят в 
фильтрат-—-при промывании
катионита дистиллированной 
‘водой. 
Адсорбированные на ка-
тионите аминокислоты элюируются из катионита путем много-
кратного встряхивания последнего с СаО (1 г СаО на 10 г ка-
тионита) и 2%-ным водным 'раствором аммиака. Полнота из-
влечения аминокислот из катионита контролируется по нингид-
ринной реакции. Полученные таким путем элюаты аминокислот
выпариваются на водяной бане почти 
досуха, 
сухой остаток
растворяется 
в 
точно 
отмеренном 
объеме 
дистиллированной
воды. 
Из 
этого 
раствора 
микропипеткой 
оютбирается 
проба
в 0,01—0,04 мл (в зависимости от предполагаемого содержания
аминокислот) для нанесения 
на 
хроматографическую бумагу.
Последняя предварительно 
обрабатывается 
цитратно-фосфат-
ным буфером с рН 7,8 (0,2-молярный раствор лимонной кис-
лоты -- 0,1-нормальный раствор Ма»НРО,). Для хроматографи-
ческого разделения аминокислот из почвенных гидролизатов в
нашей лаборатории использовались два растворителя: | — водо-
насыщенный фенол 
и 
П— амиловый ©пирт -- изопропиловЫй
спирт 
-- уксусная кислота -- вода в соотношении 4:4:1:1. При-
менение этих растворителей позволяет изолировать следующие
аминокислоты: цистин, аспарагиновую 
кислоту, 
глутаминовую
кислоту, серин, гликокол, аспарагин, треонин, аланин, пролин,
тирозин, триптофан, валин, фенилаланин, лейцин 
- изолейцин.
Локализованные на хроматограмме аминокислоты проявляются
нингидрином. Мы не останавливаемся здесь на общих приемах
хроматографического анализа, достаточно полно описываемых
264