Метод исследования клубеньков должен был обеспечить пол- ное отделение бактерий КЫ2обшт от клеточного сока и формен- ных элементов клубеньковой ткани. Было найдено, что при легком раздавливании оплавленной стеклянной палочкой клу- беньков в фарфоровой чашке с водой бактерии практически пол- ностью можно отделить от форменных элементов клубеньковой ткани путем фильтрования раздавленных под водой клубеньков через слабый бумажный фильтр. Клубеньковая ткань остается на фильтре, а бактерии вместе с разбавленным в воде клеточ- ным соком клубеньков проходят в фильтрат. Последний по- вторно фильтруют через бактериальный фильтрат — свечу Чем- берлена — с применением разрежения для ускорения фильтро- вания. Бактерии полностью остаются на Ффильтре, а раствор клеточного сока переходит в фильтрат. Отфильтрованную бакте- риалыную массу промывают на этом же фильтре дистиллиро- ванной водой и затем снимают с фильтра при помощи стеклян- ной палочки с насаженным на ее конец кусочком каучука. Микроскопическое исследование выделяемой таким путем бак- териальной массы показало, что она свободна от каких-либо по- сторонних включений. В последнее время для отделения бактерий от клеточного сока в нашей лаборатории - применяют — супер-центрифугу с 20 000 оборотов в минуту при ускорении в 12000 в. При дву- кратном центрифугировании в течение 15—20 минут взвеси бак- терий в разбавленном водой клеточном соке бактерии практи- чески полностью осаждаются на стенках ротора центрифуги. Результаты анализа клубеньковых бактерий люцерны, клеточ- ного сока клубеньков и клубеньковой ткани, отмытой от бакте- рий и клеточного сока, представлены в таблице 1. Таблица 1 Химический состав клубеньковых бактерий люцерны (ВЫхоМшт тИПоН клеточного сока клубеньков и клубеньковой ткани (мезга), % на сухой вес З 36ь я Компоненты клубенька о :‚эё : 5 М |Р.О, К,О | СаО© | МО Мо Ее ё НЕЗнЕ 5 ОХ К5 — Бактерии 18,0 19,5411,3410,37 [0,57 |0,02 10,003410,080| 9,8 Клеточный сок (сухой . остаток) 19,2 19,15/1,09| 2,611,1210,5510,0390[0,020| — Ютмытая клубеньковая ткань ° 62,8 |4,7510,45|0,1510,78|0,03 10,0030[0,040| — Судя по содержанию азота, около 55% всей массы бактерий приходится на белковые вещества. Характерным для бактерий является сравнительно высокое содержание железа. Интересно, что молибден, которому придается важная роль в фиксации 208