в стерильные емкости. Концентрирование прокариот проводили на фильтрах из
смешанных эфиров ацетата и нитрата целлюлозы (С$\/Р, МиПроге). Для этого
профильтровали максимальный объем проб с помощью поликарбонатных вакуумных
фильтрационных 
установок 
с 
объемом 
воронки 
250 мл (багюпи5). 
Установки
предварительно стерилизовали в автоклаве при 121°С и давлении 0,5 бар 30 минут.
ДНК прокариот воды озер выделяли с помощью набора РигеГ лпК МтстоБ1юте ОМА
Рипбйсайпоп Кн (ТЬегто Е15бегт 5степбНс). ПЦР проводили с универсальными праймерами
Е515/К 806 на вариабельный участок гена 165рРНК-У4 (СТОССАССМСССОСССТАА /
ССАСТАСУЗСССТАТСТААТ) (Вае$ е{ а!., 2011). ПЦР продукты очищали по
рекомендованной Шипмипа методике с использованием АМРигеХР (ВесКтап Сопет).
Подготовку библиотек для прибора Шитита М1$ед (Шитша) проводили в ЦКП
«Геномные технологии и клеточная биология» ФГБНУ ВНИИСХМ РАСХН (г. Пушкин)
с использованием набора реактивов М1$ед КеарешКи (600 сус1е) с двусторонним
чтением (2*300 н). Обработка полученных данных проводилась аналогично работе
(МешсЬвоК е{ а!., 2019). Вычисление индексов альфа-разнообразия проводили в
программе РАЗТ (Наттег е{ а!., 2001).
Для полученных результатов секвенирования проб озер были рассчитаны и
оценены индексы альфа-разнообразия и представлены в таблице 2.
Таблица 2. Значения индексов альфа-разнообразия
Озеро 
Количество прочтений 
Индекс СВао 
Индекс 5баппоп
Светлое 
11644 
268 
3,94
Светленькое 
11715 
352 
4,67
Малый Валдай 
21444 
490 
4,89
Мертвое 
48020 
322 
3,02
В озере Малый Валдай наблюдается большое количество уникальных прочтений
гена 16$ рРНК, при этом индексы СБао и 5Баппоп в хемоклине этого озера являются
наибольшими среди озер, что указывает на высокое прокариотическое разнообразие.
Несмотря на то, что в озере Мертвое количество прочтений больше, чем в остальных,
индекс 5Баппоп имеет наименьшее значения, указывающие на высокое доминирование
какого-либо таксона. Аналогичная ситуация с доминированием единичных таксонов
отмечается и в озере Светлое, при том, что количество прочтений гена 165 рРНК в 4 раза
меньше. Характер бактериального разнообразия в земоклине озера Светленькое схож с
озером Светлое, однако преобладание какого-либо таксона в этом озере, судя по индексу
$Баппоп, выражено слабо.
По результатам секвенирования было получено таксономическое распределение
бактерий и архей хемоклинов четырех меромиктических озер по филумам (рис.).
Археи были идентифицированы только в хемоклине озера Светлое. Доля архей
семейства Метпапогезиасеае филума Наобастегота составляет 0,22 %.
Доминирующими в хемоклинах озер Светлое, Светленькое, Малый Валдай и
Мертвое являются филумы Рготеобастета (25,47; 46,33; 43,79 и 9,57 %), Вастетойдота
(21,65; 5,67; 3,83 и 44,36 %) и Асйповастето!а (8,51; 4,64; 5,63 и 6,43 %). Так же в
островных озерах Светленькое, Малый Валдай и Мертвое идентифицированы филумы
Уеттисотистобгота (5,04; 4,09 и 2,12 %) и Р1апстюотусеюта (0,67; 0,68 и 0,53 %). Филум
Астаобастето!а обнаружен только в озерах Светленькое (1,31 %) и Малый Валдай (1,96
%). Только в озере Мертвое идентифицированы представители филума Еттисите5 (2,18
%). Филумы Суапобастета (19,31 %) и Ратезстбастета _ (2,87 %) распространены только
в озере Светлое.
Разнообразие доминирующих бактериальных семейств имеют большее сходство
в озерах Светленькое и Малый Валдай. Озера имеют схожие физико-химические
параметры, следовательно, и одинаковые тенденции протекания биогеохимических
761