и переносили в чистую пробирку с 1 мл плазмы форели или РВ$ так, чтобы гифы были полностью погружены в жидкость. Кровь для эксперимента отобрали от четырех условно здоровых рыб (1142 + 312 г). После 2х часовой инкубации образцы с гифами переносили на чашку Петри с агаром и наблюдали скорость роста колонии в течение 24 часов. В качестве контроля использовали образцы с гифами, обработанные буфером РВ5. Три образца 5. рагазхтса, обработанных плазмы форели, и три образца 5. рагазиса, обработанных буфером РВ$, затем были многократно отмыты в буфере РВ5 методом осаждения-ресуспендирования. Далее состав белков пробы был исследован методом ВЭЖХ-МС/МС. У больной форели, выловленной на форелевом хозяйстве, были зафиксированы изъязвление кожных покровов (в отдельных случаях утрата глаз и плавников), некроз и гиперплазия печени и кровоизлияния в кишечнике. По сравнению со здоровыми рыбами, у них был больше относительный размер печени, но не отличался размер лимфоидного органа селезенки. С измерениями размера селезенки согласуются результаты обсчета гемограммы, согласно которым по соотношению — циркулирующих — популяций лейкоцитов, рыбы с поражениями тканей вызванными $. рагазйса, также не отличались от здоровых рыб. Для проверки предположения о системной иммуносупрессии у рыб, пораженных $. рагазиса, нами был проведен анализ экспрессии про- и противовоспалительных цитокинов в селезенке рыб. Цитокины это сигнальные молекулы, которые выбрасывают иммунные клетки, когда обнаруживают захватчика или повреждение ткани и которые привлекают в место воспаления другие иммунные клетки. Молекулярный анализ также подтвердил, что несмотря на обширные поражения тканей, уровень цитокинов в организме больной рыбы не повышается. Полученные результаты наглядно показывают, что с точки зрения клеточного иммунитета больная и здоровая рыба не отличаются между собой. То есть в естественных условиях паразитические оомицеты способны оставаться «невидимыми» для — иммунной — защиты, что, — вероятно, — способствует — беспрепятственному распространению паразита в организме. Считается, что механизм подавления ответа иммунных клеток заключается в выбросе барго!евтйа 5р. простагландинов, которые обладают мощным противовоспалительным действием (Ветоше е{ а!., 2014). Поэтому хотя углеводы клеточной стенки паразитических оомицет распознаются лейкоцитами рыб (ае Вгиуп е! а!., 2012), но дальнейшая активация клеток эффективно подавляется. Данный механизм универсален для подавления клеточного звена иммунитета позвоночных (Оуезо!а еёа!., 2021; Гло ега!., 2024), что объясняет способность 5арго!1евта $р. поражать разнообразные виды рыб и амфибий и дает этим микроорганизмам высокий инвазивный потенциал. При этом в селезенке больных рыб мы обнаружили дефицит ряда белков аппарата сплайсинга РНК, что также может привести к нарушению регуляции созревания стволовых клеток крови в Т- и В-клетки и клетки-киллеры (Хапг {а!., 2021). Можно даже предположить, что именно сплайсисома является метаболической — мишенью биологически активных веществ, выделяемых 5. рагазиса и позволяющих паразиту добиться эффективного обезвреживания лейкоцитов. При этом признаки иммунного ответа у больных рыб отсутствовали не полностью. Так увеличенный размер печени может быть как следствием токсического отравления из- за массированного распада тканей, так и признаком активации синтеза антимикробных пептидов и других факторов регуляции иммунитета. Также, заметное повышение цитокина И/Б и противовоспалительного фактора {1975 было отмечено нами локально в заднем кишечнике больных рыб. Функциональный анализ белков в селезенке больных рыб выявил повышенное обилие протеолитических и лизосомальных ферментов, 612